Tth PrimPol primase試劑是一種DNA介導(dǎo)的RNA/DNA引發(fā)酶/聚合酶，即它既具有引發(fā)酶的活性有具有DNA聚合酶的活性，因此可啟動體外

RNA/DNA合成、DNA延伸和跨過主治復(fù)制的DNA修飾引導(dǎo)先導(dǎo)鏈的不連續(xù)合成。Tth PrimPol蛋白來源于嗜熱桿菌T.

 thermophilus，該蛋白具有依賴于DNA合成DNA Primer的活性（Primase），識別序列為3’-GTCC-5’，

在鎂離子存在條件下，其可利用ATP或dATP 作為輔酶合成7-9nt的DNA Primer。該蛋白為通過基因重組技術(shù)獲得的可溶純性

產(chǎn)物。

組分

組分名稱100 μg

Tth PrimPol Primase (1 μg/μl)100 μl

儲存

-20℃可保存3年。

Storage Buffer

20mM Tris-HCl，pH7.5

200mM NaCl

5mM DTT

25%甘油

Tth PrimPol primase試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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