Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)試劑該制品為雙組分的試劑，Basic Buffer Mix 包含了

反應(yīng)緩沖液、Mg

2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、凍干賦形

劑，酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、熱敏 UDG。

得益于 Bst 4.0 識(shí)別 dUTP 底物，反應(yīng)底物中不包含

dTTP，因此擴(kuò)增產(chǎn)物均為 dUTP 產(chǎn)物，在配合熱敏 UDG

的情況下，實(shí)現(xiàn)防污染性能。在實(shí)際測(cè)試中，含有 10e5 

Copies 的污染物的條件下，抑制污染擴(kuò)增。

本制品尤其適用于開蓋的 LAMP 反應(yīng)（如試紙條檢

測(cè)）、密封腔體（污染風(fēng)險(xiǎn)較高）的檢測(cè)試驗(yàn)（如定量 PCR

腔體）。試劑使用特點(diǎn)：（1）Basic Buffer Mix 中不含染料，

可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料進(jìn)行熒光檢

測(cè)。（2）本試劑適用于開蓋檢測(cè)如核酸試紙條檢測(cè)。（3）

試劑中含有凍干賦形劑，試劑可直接凍干，無需再優(yōu)化凍

干配方。

名 稱 100T 2000T

2.5xBst4.0 Basic BufferMix1 ml  20 ml

25xBst4.0/UDG Enzymes 0.1 ml1ml x2

儲(chǔ)存：-20℃保存 1 年；-80℃保存 2 年；短期使用放置于

2-8℃，保存 1 個(gè)月。反復(fù)凍融 10 次，不影響使用。如有

白色沉淀，于 37℃水浴放置 10min 后溶解沉淀，不影響

使用。

使用方法：

1. 配制 LAMP 反應(yīng)體系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到總體積 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度：FIP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 4~8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。

注意：如何應(yīng)用核酸試紙條進(jìn)行特異性檢測(cè)，可來信咨詢。

2. 反應(yīng)體系配好后，室溫（25-37°C）放置 2min，以消

化去除潛在的核酸污染，隨后置于 65°C 進(jìn)行反應(yīng)

15~30min。

試劑凍干策略（有凍干經(jīng)驗(yàn)人員操作）：

1. 配制 LAMP 凍干體系

2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl

25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

ddH2O 到體積 1.5 μl

凍干總體積 15 μl

2. 體系配制完畢后，加入 0.2 ml EP 管進(jìn)行上機(jī)凍干。

該試劑的凍干體積為 15 μl， 檢測(cè)反應(yīng)體積為 25 μl。

特別說明：

（1）本試劑防污染原理為：熱敏 UDG 消化去除含有 dUTP

的擴(kuò)增產(chǎn)物，熱敏 UDG 在隨后 50℃以上迅速失活，并不

影響后續(xù) LAMP 擴(kuò)增。因此，本試劑無法去除采用 dTTP

擴(kuò)增的污染物，也不能消化天然的核酸底物（DNA/RNA）。

為避免擴(kuò)增氣溶膠污染，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)長期使用本試劑進(jìn)行實(shí)

驗(yàn)，一旦使用 dTTP 試劑擴(kuò)增后，造成實(shí)驗(yàn)室污染，采用

本試劑不會(huì)消除假陽性擴(kuò)增。

（2）本試劑適用基于 OG 染料變色法、SYBR Green 法、

基于 Biotin/FAM 探針的核酸膠體金法（HaiGene 具有膠

體金法特異性使用策略，如需技術(shù)支持，請(qǐng)來信咨詢）。

本試劑不支持 HNB、pH 顯色法。其它使用策略自行優(yōu)化

調(diào)整。

（3）基于本試劑，HaiGene 提供凍干制備服務(wù)。八聯(lián)管

起訂量 480T，凍干球起訂量 2000T。

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