據(jù)粗略估計(jì)，大約三分之一的細(xì)胞培養(yǎng)物都感染了支原體。這些小東西神不知鬼不覺，侵入你的細(xì)胞。由于它們體積小，生長(zhǎng)緩慢，所以難以察覺。但是，它們的存在又確實(shí)改變了細(xì)胞的代謝過程，繼而干擾你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，或造成無(wú)法解釋的差異。更糟的是，拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的任務(wù)。因此，就支原體污染而言，預(yù)防是第一要?jiǎng)?wù)。下面介紹了一些簡(jiǎn)單的預(yù)防措施，也許對(duì)你有用。
細(xì)胞來(lái)源是關(guān)鍵
支原體污染的最常見原因之一是引入的培養(yǎng)物已經(jīng)被感染。一旦進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，這些小東西會(huì)蔓延到每個(gè)角落，讓你崩潰。要避免這種情況，簡(jiǎn)單的辦法就是不從其他實(shí)驗(yàn)室要細(xì)胞，而從供應(yīng)商或菌種保藏中心（ATCC或ECACC）購(gòu)買，這些細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格檢測(cè)，確保不含有支原體。
如果購(gòu)買有難度，或基于其他原因，不得不使用其他實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞，那么也要保持警惕，在單獨(dú)的培養(yǎng)箱中隔離，同時(shí)進(jìn)行支原體的檢測(cè)。上海瑞鹿生物科技公司提供多種支原體檢測(cè)試劑盒，可聯(lián)系咨詢自行選擇。
定期檢測(cè)很重要
即使實(shí)驗(yàn)室沒有新來(lái)的細(xì)胞，支原體也可能通過操作人員傳遞到現(xiàn)有的培養(yǎng)物。當(dāng)然，操作人員并不知道。支原體污染的另一條路線是通過你的細(xì)胞培養(yǎng)試劑。培養(yǎng)基、酶這些常用試劑，也有可能被支原體污染。
盡管無(wú)法避免人或試劑的污染，但常規(guī)檢測(cè)也能避免情況惡化。也許，當(dāng)支原體初次感染時(shí)，我們未必能檢測(cè)到，但盡早發(fā)現(xiàn)，就能防止這種微生物的傳播，避免大的損失。
支原體檢測(cè)有很多種。直接培養(yǎng)方法雖然準(zhǔn)確率高，但需要三到四周的時(shí)間。因此，我們?cè)诔Ｒ?guī)檢測(cè)中使用間接檢測(cè)方法已足夠，若發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性，則后續(xù)可采用較為繁瑣的直接檢測(cè)。常見的間接檢測(cè)方法有基于酶活性的熒光和生化分析、PCR分析、免疫分析等。
無(wú)菌操作要做好
支原體污染的另一個(gè)主要源頭是無(wú)菌操作不佳。盡管良好的操作可能是簡(jiǎn)單的預(yù)防措施，但說(shuō)起來(lái)容易，做起來(lái)難。每個(gè)人都會(huì)犯錯(cuò)，特別是在重復(fù)勞動(dòng)時(shí)。因此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)不定期開展培訓(xùn)和監(jiān)督，以便讓每個(gè)人都充分認(rèn)識(shí)到支原體的破壞性。
許多實(shí)驗(yàn)室目前仍使用抗生素，但細(xì)胞培養(yǎng)人員逐漸認(rèn)識(shí)到這是不負(fù)責(zé)任的，因?yàn)樗鼛?lái)了耐藥微生物的問題。相反，最好依賴自身的無(wú)菌操作來(lái)預(yù)防支原體，而只有在懷疑或確認(rèn)感染的時(shí)候才使用抗生素。
保藏細(xì)胞防萬(wàn)一
最后，通過低溫保藏儲(chǔ)備一些細(xì)胞，以防支原體大面積來(lái)襲。如果支原體有抬頭的跡象，或常規(guī)檢測(cè)呈陽(yáng)性結(jié)果，那么可靠的補(bǔ)救措施是扔掉所有培養(yǎng)物，清潔培養(yǎng)箱和超凈臺(tái)，一切從頭開始。當(dāng)然，你得確保儲(chǔ)備的細(xì)胞是不含支原體的。